Reina de la Corona de Aragón de 1506 a 1516, hasta que murió Fernando el Católico, con quien se había casado a la muerte de la reina Isabel. Desde 1507, apenas sin intervenir, fue virreina del reino de Valencia, siendo sustituida en 1520 por el conde de Mélito por sofocar la revuelta de las Germanías. En 1523 fue nombrada virreina de nuevo y se encargó de llevar a cabo una represión implacable. En 1525 murió su segundo marido, el marqués de Brandemburgo, y, al poco, volvió a casar con el duque de Calabria, con quien formó una culta y refinada corte en el palacio del Real de Valencia.